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肥达反应实验_定量凝集试验

2019.4.08
实验方法原理用已知的伤寒杆菌H，O抗原和甲，乙型副伤寒杆菌H抗原，与病人血清作定量凝集试验，以测定患者血清中有无相应抗体，根据抗体含量的多少及增长情况，可帮助诊断伤寒及副伤寒。
实验步骤

1.  取小试管28支，分四排置于试管架上，每排7支，于每排第一管分别标记H，O，PA，PB 符号。

2.  于各管内加入生理盐水0.5 mL。

3.  于每排第一管各加入1：10病人血清0.5 ml混匀后。从第一排第1管吸出0.5 ml。
 
注入第一排的第2管作倍比稀释，依次稀释至第6管，并从第6管弃去0.5 ml，第7管为对照。
 
4.  其他三排按同法稀释。
 
5.  每排从第7管开始，由后向前每管加入菌液。第一排各管加0.5 mlH菌液，第二排各管加0.5 ml菌液，第三排各管加0.5 mlPA菌液，第四排各管和加0.5 mlPB菌液。

6.  振摇试管架，混匀上述液体，置37 ℃18～24 h后取出观察结果。
 
7.  结果观察

观察时先勿振摇，以免凝块分散。先看对照管，后看试验管。
 
凝集程度以"+"，"++"，"+++"，"++++"表示，不凝集以"一"表示。"++++"：完全凝集，管底有边缘不整齐的膜状凝集块，上层液体澄清透明。
 
"+++"：大部分凝集，凝块非全部下沉于管底而是稍有铺，上层液体澄清。
 
"++"：部分凝集，管底有部分凝集块，上层液体微混浊。
 
"+"：小部分凝集，管底有小量凝集块，上层液体较混浊。
 
"一"：无凝集，液体呈均匀混浊。
 
记录实验结果及凝集效价。



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