顶空气相色谱分析血液中的乙醇
引言
近几年来,随着我国机动车的保有量越来越大，驾驶机动车所引起的交通事故逐年增多，其中酒后或醉酒驾驶引起的交通事故占了很大一部分，且多为恶性事故，为公共安全带来隐患。为此，我国《道路交通安全法》第九十一条规定，饮酒后驾驶机动车的，追究民事责任，而醉酒驾驶机动车的，由公安机关交通管理部门约束至酒醒，吊销机动车驾驶证，依法追究刑事责任。按照标准，对于认定酒后驾驶、醉酒驾驶，并不是根据行为人的意识状态，而是根据血液中的酒精含量来确定：车辆驾驶人员血液酒精含量大于或等于20mg/100mL，小于80mg/100m1的，属于酒驾；血液酒精含量大于或等于80mg/100m1的，属醉驾。目前，人体血液中酒精含量的准确检测，国际上采用顶空色谱法。随着新《交通法》的实施，驾车者血醇含量的检测日趋普遍，气相色谱法定性及定量检测血醇含量是唯一司法认定的检测手段。本文是基于《中华人民共和国公共安全行业标准》（GA/T849-2009）而开发的顶空气相色谱法进行的血液中的乙醇含量的检测[1]。本方案检测方法先进，仪器配置合理，操作简单，结果可靠，可供各级公安部门及司法鉴定中心参考。
实验部分
主要仪器设备与试剂
仪器：Trace GC 1310 气相色谱仪（ThermoFisher），Triplus300顶空自动进样器。
试剂：叔丁醇， 乙醇；
样品：人酒后血液样品
对照液及供试液的配制
对照液：吸取10.04mL或称取8.008g无水乙醇标准品置于100mL容量瓶中，添加纯净水至刻度，混匀，得8000mg/100mL乙醇储备液，将储备液逐级稀释得到浓度为400mg/100mL的对照品储备液。逐级稀释对照储备液，获得系列浓度对照工作液，浓度分别为200mg/100mL、100mg/100mL、80mg/100mL、20mg/100mL、10mg/100mL。内标工作液：准确称取1.050g叔丁醇标准品（含量不小于99.5%）置于500mL容量瓶中，添加纯净水至刻度，混匀，得200mg/100mL叔丁醇标准使用液。
待测样品及加标回收率样品的制备
吸取0.50mL待测全血两份，分别加入样品瓶内，各加入0.10mL叔丁醇标准使用液，密封混匀后，待进样。0.494mL待测全血，平行3份，分别添加6μL浓度为2000mg/100mL的乙醇标准使用液，再分别添加0.10mL叔丁醇标准使用液，按上述方法平行操作。
样品的测定
仪器条件见表 1。
结果
方法的线性关系
取2.2项下的系列浓度标准溶液0.5mL，分别加入0.1mL的叔丁醇内标液，密封后混匀进样。由低浓度至高浓度依次进样检测，以乙醇峰面积和内标叔丁醇峰面积比为纵坐标，乙醇浓度为横坐标作标准曲线线性回归。结果表明，目标物乙醇和内标叔丁醇峰形良好（图1），在10mg/100mL～200mg/100mL范围内乙醇呈良好线性关系（R2=0.9993，见图2）。
方法精密度和回收率的测定
按照2.3项下方法制备3份加标样品，密封后混匀进样，所得样品图见图3，结果见表2，回收率范围为91.32~115.40%，相对标准偏差（RSD，n=3）为2.55%。回收率和精密度数据结果见表3。
样品检测
取2.3项下的两份样品，放入顶空中检测血液中乙醇的含量，两份平行样品的结果分别为98.79mg/100mL和102.18mg/100mL，根据标准取平均值，则在该样品中，其酒精含量为100.49mg/100mL，可定为醉驾。
结论
本方法根据GA/T842-2009的步骤，结合Thermofisher的Triplus 300和Trace 1310气相色谱仪，对血液中的酒精进行检测，且经过验证，该方法简便、快速、准确；可供各级公安部门及司法鉴定中心参考。
参考文献
[1] GA/T842-2009 中华人民共和国公共行业标准 血液酒精含量的检验方法
