离子交换法(IEX)用于生物治疗性药物电荷变异体分析
应用优势
■ 通过自动化分析技术提高工作效率
■ 稳健的方法开发为生物治疗性药物电荷变异体的确证和定量带来一致且重现性良好的结果
■ 无需制备额外缓冲液，简化方法开发过程并提高方法重现性
关键词
Auto•Blend PlusTM 技术，阳离子交换，抗体，IEX，SCX，色谱，生物分离，蛋白质，方法开发，稳定性
简介
在表征和监测治疗性蛋白质的质量属性时，电荷变异体分析非常关键。脱酰胺化、N端焦谷氨酸基团修饰、异构化、唾液酸化聚糖和C端赖氨酸裁剪等蛋白质修饰作用都会导致电荷变异体的形成1。在某些情况下，这些变化会影响治疗性蛋白质的键合、生物活性、患者安全性和保质期。
生物制药行业通过离子交换色谱（IEX）和等电聚焦（IEF）凝胶电泳等方法来对电荷变异体进行表征。离子交换色谱法使用方便、适用性广并且分离度高，因此对于生物治疗性药物开发特别有用。
如果要对生物制药开发过程中治疗性蛋白质的电荷异质性进行深入表征，就需要稳定高效的IEX方法。在开发方法时，通常会对所有可能涉及到的实验参数进行全面评估，例如缓冲液/离子强度、缓冲液pH值、盐梯度、流速和柱温等。然而，想要系统性地评估各个实验参数对分离性能的影响，往往需要进行冗长的迭代过程，这涉及到各种不同成分缓冲液的制备和测试。
缓冲液制备的差异可能会导致结果不一致，进而延长方法开发时间。Waters® Auto•Blend Plus技术利用ACQUITY UPLC H-Class系统的四元溶剂管理技术，使用纯溶剂和高浓度修饰剂储备液来解决这些问题。利用Auto•Blend Plus技术计算每种储备液的混合百分比获得所需pH值，从而减少错误、降低耗材用量并缩短开发时间。
UNIFI生物制药平台解决方案因集成了上述特性，非常适用于稳定的方法开发，并轻松实现自动化，从而提高工作效率。本应用纪要旨在展示Auto•Blend Plus技术在使用离子交换（IEX）方法进行电荷变异体分离方法优化过程中的高效率和稳定性。本应用纪要使用嵌合单克隆抗体英夫利昔单抗作为治疗性蛋白质应用示例。
