光学显微镜的使用、植物细胞有丝分裂的制片和观察(1)
一、目的与要求
1、掌握光学显微镜的构造及使用方法。
2、掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术。
3、掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化。
二、实验原理
有丝分裂是植物细胞分裂的主要方式，细胞分裂过程中，核内染色体准确地复制，并有规律地、均匀地分配到两个子细胞中去，使子细胞和母细胞的遗传组成一样，保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中，如根尖组织、茎尖组织、居间分生组织、愈伤组织等，常进行着剧烈的细胞有丝分裂。在细胞分裂的适当（分裂旺盛期）时候取材，进行预处理，固定、解离、染色和涂抹压片等方法，使细胞、染色体分散，便于在显微镜下观察染色体的形态特征和变化特点及进行染色体计数。
三、实验材料
洋葱（Allium cepa, 2n=16）根尖组织
四、实验仪器
显微镜、分析天平、酒精灯、剪刀（或刀片）、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、铅笔、标签纸、胶水、棕色瓶。
五、实验试剂
1、卡诺固定液：冰醋酸:无水酒精=1:3（体积比）
2、染色液（改良苯酚品红染液）配法顺序如下：
原液A：取3克碱性品红溶于100毫升70%酒精中，此液可以长期保存。
原液B：取A液10毫升加入90毫升5%苯酚(即石炭酸)水溶液中(2周内使用)。原液C：取B液55毫升加入6毫升的冰醋酸和6毫升38%的甲醛(可长期保存)。
染色液：取C液10-20毫升，加入90-80毫升45%醋酸和1.5克山梨醇。
3、1N盐酸
六、实验步骤
（一）材料准备
通过休眠的洋葱鳞茎，经日晒后，置于盛有清水的小烧杯上，根部与水接触，20~25℃光照条件下培养2~3天，待根长1~2cm时，于上午9:00~11:00剪下根尖备用。
（二）预处理
为了获得较多中期分裂相的细胞，同时使染色体缩短和分散，可对根尖进行预处理，将根尖浸在蒸馏水中于在1~4℃低温下处理24小时。
