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细胞培养板如何选?考虑哪些因素?

2021.5.28

1. 孔的数量

 

大多数用户在组织培养瓶上开始组织培养。不过,许多应用也需要多孔板。理想的数量嘛,取决于你所需的通量水平,以及是否有机器人的协助。完全手动地向96孔板中添加试剂,这并非不可行,但有电动移液器或机器人的帮助当然更好。扩展到384孔板,就更加需要机器人,而1536孔板更是需要。当然,高密度多孔板的挑战还在于分析小型化。

 

2. 孔的形状

 

孔的底部可以选择平的、圆的,或锥形的,这取决于细胞类型和下游应用。对于传统的2D细胞培养(如HeLa或MDCK细胞),特别是需要对培养物进行成像或分光光度测定,通常选平底(F-bottom)。对于不存在接触抑制的细胞,弧形底(C-bottom)也不错。圆底(U-bottom)适合悬浮培养(如球体细胞培养),因为圆的表面让细胞难以附着和生长。而锥形底很少用于细胞培养实验,但在细胞沉淀时可能有用。

 

3. 微孔板的颜色

 

多孔板的颜色也与应用息息相关。如果用相差显微镜或肉眼观察细胞,可选择透明的多孔板。不过,对于可见光光谱以外的应用(如冷光或荧光),有颜色的多孔板(如白色或黑色)则是必需的。在使用从顶部读数的仪器时,底部应该是不透明的,而使用显微镜或底部读数的仪器时,应选择底部透明的多孔板。冷光样品通常选择白色表面,以便大限度提高信号的反射率,而大于300 nm的荧光应用通常使用黑色表面,以吸收激发信号。有颜色的表面还可以防止相邻孔之间的信号串扰。

 

4. 表面处理

 

选择哪种细胞表面处理,这要取决于你培养的是悬浮细胞还是贴壁细胞。对于悬浮或球体细胞培养,建议使用有疏水凝胶处理的微孔板,可抑制细胞或蛋白附着。对于轻松附着的贴壁细胞(如HeLa),标准的组织培养表面就足够了。对于那些贴壁有困难的细胞(如原代细胞),或涉及到严格洗涤的应用,建议使用不需要冷藏的微孔板。这种独特的表面与多聚赖氨酸处理的表面相似,但它不是涂层,而是塑料性质的物理变化。

 

后,当然不能忽视培养容器的质量。这不仅仅指微孔板,还包括与细胞接触的一切,比如吸头,以避免细胞污染或死亡。

 




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