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姐妹染色单体交换(SCE)试验的基本内容

2022.4.11

  SCE是染色体同源座位上DNA复制产物的相互交换,SCE可能与DNA的断裂和重接有关,提示DNA损伤。SCE试验可分为体外试验、体内试验和体内、体外结合试验。体外SCE试验可采用贴壁生长的细胞,如CHO、V79、CHL等,也可用悬浮生长的细胞,如人外周血淋巴细胞。细胞在含5-溴脱氧尿苷(BrdU)的培养液中生长两个周期。由于Brdu是嘧啶类似物,可于合成期中掺入DNA互补链,所以在下一个中期所见染色体姐妹染色单体之间各有一条互补链掺入了Brdu,于是Brdu对称姐妹染色单体造成同等的干扰,其染色并无区别。但到了第二个周期中期相,每个染色体中只有一条染色单体保留了原来不带Brdu的模板链,而另一条染色单体则是上一周期带Brdu的互补链成为模板链。于是经两个周期的Brdu掺入互补链可使两姐妹染色单体所含Brdu量不相等,从而出现染色差别。如果Brdu仅在第1周期掺入,第2周期不掺入,则第2中期相似可见姐妹染色单体染色有差别。如果DNA单链发生了断裂,而且在修复过程中发生重排,就在第2周期可见姐妹染色单体同位节段的相互交换。经差别染色后,可观察到两条明暗不同的染色单体。若两条染色单体间发生等位交换,可根据每条染色单体内出现深浅不同的染色片段进行识别和计数。

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