常用的免疫组织化学方法
一. 直接法: 是zui早出现的方法,是将酶直接标记在特异性抗体上,与标本中的抗原结合,让酶催化底物反应产生有色物质,可以在光镜下检测. 直接法放大作用小,不够敏感, 且标记一种抗体只能检测一种抗原,所以应用就受到了限制.
二 . 间接法
是将酶标记在第二抗体上,形成抗原/一抗 /二抗-酶复合物,zui后酶底物显色来放大信号. 由于一抗多来源于兔,小鼠或山羊等有限的几种动物,所以仅需制备酶标记的一抗来源的IgG就可以检测很多的抗体,放大效果也有所提高.为了追求更大的放大效果,人们有发明了PAP的桥联法,虽然敏感性有所提高,但是同时出现了较高的非特异性背景,及假阳性等问题.随后被生物素－卵白素系统所取代。
三. 生物素-卵白素系统
生物素(biotin)是一种244Da的小分子的维生素。卵白素（avidin)又称作抗生物素是一种68kDa的糖蛋白。生物素与抗生物素有很强的亲合力，两者一旦结合就很难解离。同时，生物素和抗生物素都具有与其他示踪剂，如荧光素，过氧化物酶等相结合的能力。抗体
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