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基因测序仪原理

2021.5.11

  目前DNA测序仪的工作原理主要基于Sanger发明的双脱氧链末端终止法或Maxam-Gilbert发明的化学降解法。这两种方法在原理上虽然不同,但都是根据在某一固定的位点开始核苷酸链的延伸,随机在某一个特定的碱基处终止,产生以A、T、C、G为末端的四组不同长度的一系列核苷酸链,在变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳进行片段的分离和检测,从而获得DNA序列。由于双脱氧链末端终止法更简便和更适合于光学自动探测,因此在单纯以测定DNA序列为目的的全自动DNA测序仪中应用广泛。而化学降解法在研究DNA的二级结构以及蛋白质-DNA相互作用中具有重要的应用价值。这里主要介绍双脱氧链末端终止法的测序原理 。

  双脱氧链末端终止法测序是利用DNA的体外合成过程-聚合酶链反应,在DNA聚合酶的催化作用下,以目的DNA为模板,按照碱基互补配对原则,在引物的引导下完成。

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