了解一下单细胞铺板可能会出现的问题
单细胞铺板采用微流体技术能够实现快速,高效,准确的细胞铺板工作,并且分离过程轻柔,不会影响细胞的后续生长,能广泛应用于单抗开发中的CLD环节,以及单细胞测序等。
原理如下:将细胞通过一次性的芯片上端加样孔,注入到芯片腔体中,单细胞流在微流控通道中流过激光检测区域,机器能对细胞进行识别,去除掉细胞碎片,死细胞以及状态较差的细胞,落到孔板中的细胞都具有很好的活性,高速电子阀门能够捕获每一个活性细胞,轻柔地落进孔板中,整个过程对细胞的损伤可以忽略不计,所以分选得到的细胞绝大多数的细胞都能再次分裂生长。
下面我们再来了解一下单细胞铺板可能会出现的问题
1、细胞计数前后出现较大误差?
考虑细胞沉降导致悬液不匀;悬液体积过大或过小;稀释倍数太高或太低等原因造成。
2、如何克服细胞悬液不均匀的问题?
尽量将细胞吹打为单个,防止抱团,且用移液枪充分吹打,使其均匀悬浮在培养基中。
3、一般加多少细胞悬液合适?
由于加入计数室的量,过少会导致计数室内出现气泡,过多则会使得计数板上的盖玻片不紧贴计数板,使得高度变高。
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