RNA Extraction (mini prep):Trizol法实验原理和步骤
RNA的制备与分析对于了解基因在转录水平上的表达与调控和cDNA的合成都是必须的，RNA的纯度和完整性对于Northern blot，RT-PCR 和cDNA文库的构建等分子生物学实验都至关重要。RNA分离的方法很多，其中最关键的因素是尽量减少RNA酶的污染
实验原理：
Trizol 试剂是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的单相的快速抽提总RNA的试剂，在匀浆和裂解过程中，能在破碎细胞、降解细胞其它成分的同时保持RNA的完整性。在氯仿抽提、离心分离后，RNA处于水相中，将水相转管后用异丙醇沉淀RNA。
用这种方法得到的总 RNA中蛋白质和DNA污染很少，可以用来做Northern,RT-PCR,分离mRNA，体外翻译和分子克隆等。
实验步骤：
1.液氮研磨样植物叶片，每1.5ml tube分装0.1克样品；
2.每管加1毫升Trizol 试剂（样品体积不超过Trizol 试剂体积的10％），迅速混匀（若样品较多可先将混好的样品置于冰上）；室温下净置5－10分钟以利于核酸蛋白质复合体的解离；
7. 弃上清，加1ml 75％乙醇清洗RNA，振荡片刻后（务必使沉淀悬浮起来，以确保洗涤干净），7500×g 离心5分钟，小心弃上清；
8.室温静置5－15分，使RNA沉淀恰好干燥，加入20 µl DEPC水溶解，取2 µl 琼脂糖电泳检测RNA质量。采用分光光度计测定RNA浓度，将样品保存于-70 ℃超低温冰箱中备用。
注意事项：
抽提及操作RNA中要谨防 RNase的污染，因此操作RNA的试剂及器皿都要进行相应的处理。
RNase- free water：Draw water to RNase- free glass bottles. Add
diethylpyrocarbonate （DEPC）to 0.01% . Let stand overnight and autoclave.
研钵处理：0.4N NaOH 浸泡过夜，DEPC水洗涤3遍；
应戴口罩和手套，环境洁净；玻璃器皿180ºC烘烤3hrs以上；塑料制品DEPC水清洗，蛋白质变性剂处理；一次性用品如tube，tip等用新的，高温高压消毒。
