密螺旋体活动试验的注意事项及检查过程
注意事项
检查时要求:
(1) 抽血检查时,出现晕针症状如:头晕、眼花、乏力等应立即平卧、饮少量糖水,待症状缓解后再进行。
(2) 早期梅毒菌先出现阳性,特异性为94%-100%。
检查前准备:检查前一天的晚八时以后,应禁食,以免影响第二天的检测。
不适宜人群:没有不适宜人群。
检查过程
病原体的检测:标本的采集,在发病一周内取血液,第二周取尿,有脑膜刺激症状取脑脊液,其检出率较高。
(1) 直接镜检:将标本用差速离心集菌后作暗视野镜检或用Fontana镀银染色镜检,也可用直接免疫荧光法或免疫酶染色法检查。
(2) 分离培养与鉴定:将标本接种在Korthof培养基中,28℃培养2-4周,如有生长则培养基变混浊,再用暗视野显微镜检查钩体的存在,如有钩体再用血清学方法鉴定其群型。
(3) 动物接种:是分离钩体的敏感方法,尤其适用于有杂菌污染的标本。方法是将标本接种于幼龄和地鼠腹腔。接种3-5天后,用暗视野查腹腔液;可取心血检查并作分离培养。动物死后解剖,可见肺部和皮下有出血斑、肝、脾等脏器中有大量钩端螺旋体存在。
(4) 检测核酸方法:用同位素或生物素标记DNA探针进行核酸杂交及PCR方法均可检测标本中钩端螺旋体的核酸进行诊断,其特异性、敏感性均优于培养法,且得出的结果快速。此外限制性内切酶指纹图谱也可用于钩端螺旋体的菌株鉴定和分型。
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