大鼠环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA检测法
4. 即用，或放-20/-70℃保存3天。计算结果时乘以稀释倍数50。（注意：不同的标本cGMP的水平可能有较大差异，请根据实际情况灵活掌握稀释度）
5. 细胞培养上清或组织匀浆10倍稀释(410ul的标本稀释液＋50ul样本＋20ul的1N HCI+20ul的1N NaOH)。
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品（已激活）100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul，置37 ℃暗处反应15分钟。
8. 每孔加入100ul终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。
2. 以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0 pmol/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应cGMP含量，再乘上稀释倍数即可。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的cGMP 检测浓度小于15pmol/ml。
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠cGMP。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。
3. 重复性：板内、板见变异系数均小于8.9％。
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。
2. 洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。
3. 板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。
5. 本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！
