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2 TdT原位凋亡检测(TUNEL法)试剂盒说明

2020.6.29

DNA断裂是细胞凋亡的重要特征,在凋亡初期,DNA可断裂形成200-250kb或30-35kb 的大片段;晚期则可进一步在核小体间断裂,形成180-200bp的DNA断裂碎片。TUNEL(TdT mediated dUTP Nick End Labeling,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记法)可以检测到任何形式的DNA断裂,业已成为细胞凋亡检测的常用方法,其结果可用光学显微镜或流式细胞仪进行分析。可用TACS® 2 TdT原位凋亡检测(TUNEL法)试剂盒进行试验。

TUNEL法原位检测即是利用外源性的TdT酶(Terminal deoxynucleotidy transferase,末端脱氧核苷酸转移酶),将标记的底物dUTP或BrdU(无或有荧光标记)加到DNA的断点上,从而实现对DNA断点的标记, 然后用酶法(如HRP-抗dUTP抗体)或荧光法(如BrdU-FITC)来检测结果,以显示凋亡时DNA断裂的程度。艾美捷向您推荐享誉全球的 Trevigen TUNEL全系列解决方案。这些方案包括,基于BrdU渗入并检测原理的TACS® XL原位凋亡检测方案,基于TdT酶将生物素Biotin标记dUTP渗入并标记的TACS® 2 TdT TUNEL检测方案,专门针对不同组织(如神经/肿瘤/心肌/血管/皮肤等)样本的TUNEL检测方案,另外还有分别适用于微孔板检测和流式细胞术检测的 TUNEL方案等。

 

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TACS® 2 TdT DAB (diaminobenzidine) Kit对断奶后小鼠乳房组织的DNA  片段化染色后光学显微镜观察结果

其中Trevigen独特的TACS® 2 TdT试剂盒利用Trevigen独有的阳离子优化体系在特定组织内增强标记信号,并结合独特的无毒标记液提高操作的安全性。试剂盒内选用高度纯化的TdT酶配以生物素化核苷酸进行原位标记,后继采用链亲和素-辣根过氧化物酶体系进行检测,最终使用DAB或TACS蓝色标记进行生物素标记检测。另外还有荧光检测方案,即采用荧光素偶联的链亲和素检测,并使用表面荧光显微镜直接观察结果。这些完全试剂盒提供标记所需全部试剂,包括两种透化剂、标记和检测试剂、终止液、复染以及制备阳性对照的TACS-核酸酶试剂。其中TACS 2 TdT原位凋亡核心试剂盒仅提供了TUNEL所需的基本试剂,包括TdT标记、检测、终止溶液以及TdT酶和相关缓冲液;TACS 2 TdT原位凋亡DAB检测试剂盒则在核心试剂盒的基础上还提供了两种透化剂、复染试剂、制备阳性参照的TACS-核酸酶,以及DAB底物;TACS 2 TdT蓝色标记原位凋亡检测试剂盒则只是采用独有的显示蓝色标记,最终显色为蓝色;而TACS 2 TdT荧光标记原位凋亡检测试剂盒则最终为绿色荧光显色并观察。TACS® 2 TdT Replenisher Kit补充试剂盒仅提供了核心试剂盒中的TdT检测溶液、TdT酶和相关缓冲液等。

TACS® 2 TdT系列试剂盒具有如下特点:1、基于TdT的原位标记;2、高信噪比,信号强,背景低;3、提供DAB,TACS蓝色标记或荧光检测等多种选择的完全试剂盒;4、包含独一无二的Cytonin通透化试剂;5、包含TACS-核酶阳性对照试剂。


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