现有技术水平蛋白质水平上研究基因功能的技术有哪些
随着分子生物学技术的开展，对生物基因组中包含的全部基因及其所翻译的蛋白质的功用加以解读和描绘，特别是大量未知基因的功用及其相应蛋白质产物的功用停止研讨成了基因工程研讨的热点方向。而在蛋白质程度上定量、动态、整体性研讨生物体的蛋白质组学，将在后基因组时期大大促进我们对基因功用的了解。酵母双杂交实验效劳是一项能够在蛋白质程度上研讨基因功用的实验效劳，除此以外还有蛋白质双向凝胶电泳、噬菌体展现技术、免疫组化和western印迹剖析技术等。
1、酵母双杂交技术
酵母双杂交技术是从蛋白质组学程度研讨基因功用的有力工具，酵母双杂交是目前研讨蛋白与蛋白间互相作用的一切办法中较为烦琐、灵活和高效的一种办法。它是应用酵母遗传学办法在真核细胞体内研讨蛋白质之间互相作用的十分有效的分子生物学技术可有效地用来别离能与一种已知的靶蛋白互相作用的蛋白质的编码基因。
酵母双杂交技术的可行性和有效性在考证已知蛋白质之间的互相作用或挑选与靶蛋白特异作用的诱饵蛋白的研讨中已被普遍的得到证明。基于酵母双杂交技术平台的特性，它曾经被应用在许多研讨工作中，
酵母双杂交实验效劳能够协助客户剖析和处理在实验过程中遇到的难题。美迪西生物医药专业从事酵母双杂交，出具权威检测数据报告，具有独立优质实验室，专业实验人员，提供细致的酵母双杂交实验步骤，原始数据和图片，结果剖析。
固然酵母双杂交系统是剖析蛋白-蛋白间互相作用的有效和快速的办法，但是该技术存在假阳性和假阴性的现象，反映的只是蛋白质间发作作用的可能性，至于其可能性的大小还需求经过其他手腕来考证。酵母双杂交系统还存在一定的缺陷，但是我们置信随着酵母双杂交技术的日趋成熟，酵母双杂交的应用将越来越普遍，其也将在蛋白质互相作用的检测及其他方面发挥重要的功用。
2、噬菌体展现技术
当有些蛋白质自身有激活转录活性，不经过双杂交互相作用就能激活报道基因的表达，酵母双杂交技术就检测不出来，但是经过噬菌体展现技术能够处理这个问题。和酵母双杂交技术研讨基因功用相比，噬菌体展现技术同样具有高通量及烦琐的特性，不同于发作在酵母细胞核内的酵母双杂交技术，噬菌体展现技术发作在溶液中。作为一项已普遍运用的技术，噬菌体展现是一种将外源肽或蛋白质与特定噬菌体衣壳蛋白交融并展现于噬菌体外表的技术。它将外源基因插入到噬菌体展现载体的信号肽基因和衣壳蛋白编码基因之间，从而使外源基因编码的多肽或蛋白质与外壳蛋白以交融蛋白质方式展现在噬菌体外表，被展现的外源肽或蛋白质可坚持相对独立的空间构造和生物活性。噬菌体展现技术停止基因功用研讨，具有能够直接得到基因、高选择性的挑选复杂混合物，在挑选过程中经过改动恰当的条件能够直接评价互相分离的特异性等优点。
3、蛋白质双向凝胶电泳
蛋白质双向凝胶电泳技术是停止蛋白质组学研讨最经典和常用的技术之一，其别离蛋白主要是根据两个原理：第一向等电聚焦(IEF)依据蛋白质的等电点差别停止蛋白别离，第二向十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)依据蛋白质的分子量差别停止别离。以蛋白质双向凝胶电泳为根底的蛋白质组别离技术曾经得到普遍的应用，如辨认细胞、组织或生物体在特定条件下整体蛋白质的表达情况；蛋白质组也完成了在蛋白质程度大范围停止基因功用的研讨。
4、Werstern blot
此外在蛋白质程度上研讨基因功用的技术还有Western blot和免疫组化等。蛋白免疫印迹即Werstern blot，是将印迹技术与抗原-抗体反响的特异性相分离的检测技术，用于别离和检测生物标本中的某一特定蛋白。其根本原理实混合蛋白质样本经过凝胶电泳别离后，经过特殊虹吸或电场安装印迹至固相介质（NC膜或PVDF 膜）上，将针看待测蛋白的特异性抗体作用于滤膜上，应用抗体上偶联的酶降解底物在滤膜上生成有色沉淀物或化学发光产物，从而显现出待测蛋白的存在及量。
Western blot被普遍应用于多种基因功用、转基因检测等实验中。免疫组化是研讨细胞内蛋白质定位、定量的重要办法，具有特异性强和敏理性高等特性，可以精确肯定蛋白质是在特定组织中的哪些细胞及在特定细胞的哪个部位中表达。
基因功用研讨能够应用构造基因组所提供的信息和产物，开展和应用新的实验手腕，经过在基因组或系统程度上全面剖析基因的功用，使得生物学研讨从对单一基因或蛋白质的研讨转向多个基因或蛋白质同时停止系统的研讨。基因功用的研讨为人们深化了解人类人类组遗传言语的逻辑构建、基因构造与功用的关系、个体发育、生长以及细胞增殖、分化等研讨提供了科学研讨根底，因此至关重要。
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