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关于实验室移液精准性的相关分析介绍

2022.2.25

  1、移液精准性重要性

   无论在生物分子实验领域还是其他分析测试领域,移液的精准性在整个实验过程中都会起到至关重要的作用。一旦产生不可控的移液误差,会直接影响整个测试数据的真实性,以及分析结果的正确性。因次,移液精准度是移液工作站最重要的技术指标,没有之一。

  2、移液精准度的定义

  准确度(Accuracy)是指测定结果与真实值之间的接近程度,以误差来表示。一般用来表示系统误差的大小。误差越小,分析结果的准确度越高。

  精密度(Precision)是指使用同种样品进行重复测定所得到的结果之间的重现性。一般用来表示测定过程中随机误差的大小。精密度通常以标准差或方差来量度,方差越小,精密度越高。

  3、移液精准度影响因素

  气密性

  气密性主要表现在二个方面,一是设备移液泵系统内部的气密性,二是移液吸头(Tip头)与barrel之间配合的连接气密性。

  环境

  众所周知,移液过程的温度、湿度、气压等外界环境都影响着移液精准度,为了避免不准确的移液结果:

  ①应尽量将移液吸头和液体保持在同一温度范围内;

  ②对温度较低的液体进行移液时,在每次分液后更换吸头,以防止吸头温度的变化 。

  液体性质

  移液工作站在处理较粘稠状态物质时,使用原有吸排液参数进行移液,很有可能出现移液准确度误差较大的情况,因此,在处理不同液体时要根据实际需要体积数值,来进行校准补偿工作站移液泵的系统参数。

   移液吸头

  移液吸头的原材料质量、模具、生产工艺技术、生产设备等都直接影响到吸头的质量稳定性,既而影响着移液的精准度。如吸头材质或模具光滑度都会影响液体的残留。

  4、精准度的检测方法

  1)精密度

  当测试体积小于1μL时,建议使用分光光度法检测。将液体工作站设定调至目标体积,然后移取染料溶液,加入一定体积的蒸馏水中,测定溶液的吸光度,重复几次移液操作,计算移液的精密度。

  当测试体积大于1μL时,使用称重法检测。通过对水的称重,重复称量几次待测样本质量,转换成体积(体积=质量/密度),计算移液的精密度。

  精密度计算公式:

  CV:相对标准偏差(RSD)=标准偏差(SD)/计算结果的算术平均值(X)*100%

  2 ) 准确度

  通常我们采用称量法进行准确度的检测。通过对水的称重,转换成体积(体积=质量/密度),鉴别移液的准确性。

  准确度计算公式:准确度A,V=平均体积,V0=各体积

  A%(准确度)=(V -V0)/V

  注意:称重法实验室必备条件是高度灵敏的分析天平(定期校准)、双蒸水和称量容器。水、移液器和吸头必须具有相同的温度(20℃时水的密度为0.09982)。

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