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电泳槽使用及凝胶电泳

2019.4.23

实验概要

电泳技术是分子生物学的基本技术,通过该实验的学习掌握DNA电泳槽使用及凝胶电泳技术。
 

实验步骤

1.   先用胶布将电泳槽的两端封住,防止倒胶后液体漏出,插上梳子,梳子底部与槽底部平行并留有间隙。将凝胶(通常为1%-2%)融化成澄清的液体后(无块状凝胶固体),少冷却加入EB。将胶倒入电泳槽内。待胶凝固后,将梳子拔出,胶布拆掉。

2.    将电泳槽至于电泳仪内,电泳仪内倒上电泳buffer溶液, buffer溶液应该刚好盖过胶平面。

3.    在梳槽里点样。

4.    在接通电源之前,要注意检查电泳槽所接电极的极性是否与样品在载体中泳动的方向相一致,方向: DNA样品由负极往正极跑。选择开始,看到电极上有 气泡产生是说明电泳开始了。

5.    观察marker带判断合适的电泳时间。

6.    整个过程戴手套操作。弃用的手套扔到指定的地点。
 

注意事项

电泳槽在使用过程中应避免接触有机溶剂,有机玻璃可以溶解于烃类等有机溶剂,也不要用酒精擦拭电泳槽,有机玻璃与酒精接触后会出现银纹现象, 影响电泳槽的使用寿命。应该用洗涤剂清洗电泳槽。有机玻璃耐热温度低于80℃,故制胶时应在凝胶溶液冷却到80℃以下时方可将溶液倒入凝胶托盘,否则,梳子和托盘会发生变形而导致损坏。


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