细胞免疫组化不着色的原因
下面是我们做细胞免疫组化的大致步骤，给楼主做一下参考吧：
1、将爬有细胞的盖玻片，PBS洗3次，每次3分钟。
2、加入4％多聚甲醛，固定10分钟，PBS洗3次。
3、用含0.2％TritonX-100 的PBS溶液透化固定后的细胞3分钟，PBS洗涤细胞3次。
4、在Parafilm膜上滴加5％BSA封闭液50μl，将盖玻片有细胞的一面向下盖在封闭液上，室温封闭20分钟。甩去多余液体，不洗。
5、在Parafilm膜上加一抗，将盖玻片有细胞的一面向下盖在抗体上，置湿盒中于37℃孵箱中孵育2小时。阴性对照用PBS代替一抗。
6、PBS洗3次, 每次5分钟。
7、在Parafilm膜上加二抗50，将盖玻片有细胞的一面向下盖在二抗上，37℃孵育30分钟。
8、PBS洗3次, 每次5分钟。
9、在Parafilm膜上加SABC试剂50μl，将盖玻片有细胞的一面向下盖在其上，37℃静置20分钟。
10、PBS洗4次, 每次5分钟。
11、将新鲜配制的DAB试剂加入样品。镜下控制反应时间，一般在5～10分钟之间。蒸馏水漂洗数次终止反应。、
12、显微镜下观察，照相。
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