紫外吸收法对溶液的pH和盐浓度敏感
在研究物质吸光度时，我们总要明确地定义缓冲液的离子强度以及pH，这就说明，吸光度本身是受到这两个因素影响的。
通常而言，偏酸的溶液，容易给出偏低的A260/A280数值。相反，偏碱的溶液则容易高估。相应地，也有报道称，当用水作为溶剂时，紫外吸收测定的数值变异度增大，而当使用Tris或Tris-EDTA溶液进行测定时，重复性就提高了。这其中的原因，很可能是空气中溶解入水中的CO2浓度差异造成的。离子强度对于紫外吸收的影响比较复杂，这里不展开。
相比之下，荧光染料法对样品的污染和pH等的容忍度较大。
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