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血管内皮细胞的分离和培养_分离人心脏内皮细胞(HCEC)

2019.4.05
实验方法原理根据 McDouall 等 [ 1996 ] 的方法可以分离人的 CEC。
实验材料

Ⅱ型胶原蛋白酶

试剂、试剂盒

HCEC生长培养液

仪器、耗材

磁珠

实验步骤

1. 按分离小鼠心脏内皮细胞的步骤操作。

2. 在步骤 7 用 Ⅱ 型胶原蛋白酶(1 mg/ml)消化组织。

3. 按照方案23.28C 的步骤 20,用包被人 MHC-Ⅱ 类抗原或 CD31 抗体的磁珠分选内皮细胞。然后,从方案23. 28C 的步骤 23 继续操作。

4. 用 HCEC 生长培养液(含有 4 mmol/L L-谷氨酰胺的 M199,添加 10 % FBS、10 % 人男性 AB 血清(Sigma)、150 U/ml 青霉素、150 μg/ml 链霉素和 ECGS )维持培养 HCEC 。


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