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哪些因素可以影响色谱柱的分离效果?

2021.10.21

一、硅胶纯度:

  硅胶纯度对峰形有很大液相,硅胶杂质和残留的金属离子会影响样品的峰形,如果硅胶表面的金属含量高会影响碱性化合物的峰形,易发生拖尾。

  二、颗粒形状及粒径: 

  球形颗粒柱效高、重现性好、柱床结构均匀;不规则的颗粒柱床结构不均匀、流动相线速度不均匀,容易形成谱带展宽;平均颗粒直径,粒径越小,柱效越高,柱压也越高。粒径分布越广则柱效越低,压力越大。

  三、颗粒表面积:

  相对而言,高表面积对样品具有较强的保留能力,更大的柱容量和分离度。而低表面积能更快达到平衡状态,更适合梯度洗脱程序。

  除了以上这些因素,还有诸如键合类型及键合相、碳覆盖率等因素影响。单体键合方式可以提高传质速率,缩短柱平衡时间;聚合体键合方式可以增加色谱柱稳定性,增加载样量。键合相的不同会直接影响化合物的保留行为。而高碳覆盖率可以提高分辨率和重现性,但分析时间长。



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