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有哪些因素可以干扰folin

2023.3.24

  1.干扰物质
  此法是在Folin-酚法的基础上引入双缩脲试剂,因此凡干扰双缩脲反应的基团,如-CO-NH2,-CH2-NH2,-CS-NH2以及在性质上是氨基酸或肽的缓冲剂,如Tris缓冲剂以及蔗糖,硫酸铵,巯基化合物均可干扰Folin-酚反应。此外,所测的蛋白质样品中,若含有酚类及柠檬酸,均对此反应有干扰作用。而浓度较低的尿素(约0.5%左右),胍(0.5%左右),硫酸钠(1%),硝酸钠(1%),三氯乙酸(0.5%),乙醇(5%),乙醚(5%),丙酮(0.5%)对显色无影响,这些物质在所测样品中含量较高时,则需做校正曲线。若所测的样品中含硫酸铵,则需增加碳酸钠—氢氧化钠浓度即可显色测定。若样品酸度较高,也需提高碳酸钠—氢氧化钠浓度1—2倍,这样即可纠正显色后色浅的弊病。
  2.控制时间
  因Lowry反应的显色随时间不断加深,因此各项操作必须精确控制时间。即第1支试管加入2.0ml碱性硫酸铜试剂后,开始计时,1分钟后,第2支试管加入2.0ml碱性硫酸铜试剂,2分钟后加第3支试管,以此类推。全部试管加完碱性硫酸铜试剂后若已到10分钟,则第1支试管可立即加入0.20ml Folin-酚试剂,1分钟后第2支试管加入0.20ml Folin-酚试剂,2分钟后加第3支试管,以此类推。40℃水浴10min,冷却后,每一分钟测定一管吸光值。

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