细胞筛选方法和步骤
筛选步骤：
a.杀灭曲线的确定
将未转染的细胞按每孔0.05million铺入24孔板，孵育过夜，
2.第二天，除去24孔板中旧的培养基，
3.将含不同浓度嘌呤霉素（1ug/mL，2ug/mL，3ug/mL，4ug/mL，5 ug/mL，6ug/mL，7ug/mL）的新鲜培养基加入已铺有细胞的24孔板，
4.每2天更换新鲜的筛选培养基，
5.每天观察细胞的存活比例，
6.最小的嘌呤霉素使用浓度就是从嘌呤霉素筛选开始1-4d内杀死所有细胞的最低筛选浓度。
b.嘌呤霉素筛选转染细胞
第一天，将转染的细胞按每孔0.05million铺入24孔板，孵育过夜，
2.第二天，除去24孔板中旧的培养基，
3.加入含嘌呤霉素（2ug/mL）的筛选培养基，孵育，
4.每2天更换新鲜的筛选培养基，
5.每天观察细胞的存活比例，
6.在同一时间点（2d）存活的细胞，即为转染成功细胞，
7.对筛选后的细胞进行扩增。
推荐
