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细菌耐药表型的检测

2021.5.17

β-内酰胺酶检测

    β-内酰胺酶(β-lactamase)是细菌产生的可水解β-内酰胺环抗生素的酶。β-内酰胺酶的产生是细菌对(β-内酰胺类)抗菌药物耐药最常见的机制,广泛地涉及到许多社区获得性感染和医院内感染的重要病原菌,在各种耐药机制中占80%。
    β-内酰胺酶是由多种酶组成的酶家族,通过水解或非水解方式破坏进入菌体内的β-内酰胺环,导致β-内酰胺类抗生素失活,这些酶的基因存在于细菌的染色体或质粒中。
     主要有淀粉法和头孢硝噻吩纸片法。临床常用头孢硝噻吩纸片法。纸片由黄色变成红色为阳性,表明待检菌产生β-内酰胺酶。

 
超广谱β-内酰胺酶检测

    超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamases,ESBL)是质粒介导的一类水解酶,由普通β-内酰胺酶基因(TEM-1、TEM-2、SHV-1)突变而来,多见于 使用青霉素类和头孢菌素类抗生素诱导肠杆菌科细菌产生.
    ESBL是一种能水解青霉素类、广谱头孢菌素及单环β-内酰胺类的酶,主要由克雷伯菌、肠杆菌等细菌产生。
    目前,ESBL检测方法常用纸片扩散法、稀释法进行抑菌环、MIC测定,其检测对象为肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌。
    CLSI纸片法:
    ESBL纸片法表型筛选试验:头孢泊肟,头孢他定,头孢噻肟,氨曲南及头孢曲松的抑菌圈缩小。
    ESBL纸片法表型确证试验:抗生素在有克拉维酸存在时,其抑菌圈的增加。
       
 
耐甲氧西林葡萄球菌检测MRS

    金黄色葡萄球菌:30ug头孢西丁纸片的抑菌圈直径≤21mm或苯唑西林MIC≥4ug/ml
    凝固酶阴性葡萄球菌:30ug头孢西丁纸片的抑菌圈直径≤24mm或苯唑西林MIC≥0.5ug/ml
    符合以上其中一种情况的被称为耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)
 
D实验--克林霉素诱导的耐药实验


    对红霉素耐药、克林霉素敏感或中介的葡萄球菌,可能对克林霉素耐药。
    D实验----通过红霉素检测克林霉素的诱导耐药性:
     -由突变导致的结构性耐药
     -导致治疗失败的风险
     -流行病学的需要


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