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酶标仪--酶标仪的检测单位和检测值计算

2021.11.15

光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。

检测单位用OD值表示, OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度, OD=log(1/trans),其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则,OD值与光强度成下述关系:

E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度, Ιo 为在检测物之前的光强度,Ι为从被检测物出来的光强度。

OD值由下述公式计算:

c为检测物的浓度 b为检测物的厚度 a为摩尔因子

在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波长。

但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收,为了消除这种非特异性吸收,我们再选取一个参照波长,以消除这个不准确性。在参照波长下,检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。

仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量,转换成二进位数字信号,最大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为 0%,没有检测物的透光值为100%。则实际检测中,检测物的透光值均在 0%一100%之间。透光值的计算如下:

T=(Meas—Min)/(Max—Min)

其中T为透光值, Meas为检测的二进位数值, Min为在 0%的情况下检测的二进位数值, Max为在100%的情况下检测的二进位数值,举例如下:

MaX=3600

Min=20

Meas=30

T=(30-20)/3600-20)=0.0028

OD=log(1/T)=log(1/0.0028)=2.552


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