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二代测序及其应用

2023.1.31

二代测序为高通量测序,采用微珠或高密度芯片边合成边测序,代表有454,solexa,solid,高通量,可一次获得数G数据,相对与第三代,都仍然需要扩增的方法放大信号,扩增后再检测。

二代测序应用如下:
1、Illumina 原理:桥式PCR+4色荧光可逆终止+激光扫描成像。
2、Roche 454:油包水PCR + 4种dNTP车轮大战 + 检测焦磷酸水解发光。
3、Ion Torrent 原理:油包水PCR + 4种dNTP车轮大战 + 微电极PH检测。

二代测序相比一代测序大幅降低了成本,保持了较高准确性,并且大幅降低了测序时间,将一个人类基因组从3年降为1周以内,但在序列读长方面比起第一代测序技术则要短很多,这也给三代测序提供了发展空间。

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