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食用菌二级菌种和三级菌种接种箱(室)的杂菌检查

2019.9.12

接种箱(室)在使用前必须进行消毒处理。消毒效果的好坏直接影响到接种的成败和菌丝生长情况。定期检验接种箱(室)的空气污染情况,对改进消毒措施,提高接种成功率是非常必要的。

(1)平板检验法取内径90mm的无菌培养皿若干,采用常规培养基(培养细菌一般采用牛肉膏蛋白胨培养基,培养真菌一般采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基),按照无菌操作要求制成平板,每种培养基制6个,然后分别放入已消毒的接种箱(室)内。检验时,按照无菌操作方法每种培养基平板各打开3个,其他留作对照不打开。暴露5min后重新盖上平皿盖,然后将所有平板置于30℃培养箱中培养48h(培养真菌时间略长,一般3~5d),检查有无菌落出现,并由菌落形态,判断杂菌种类。一般要求平板菌落不超过3个,说明消毒效果较好,否则必须采取措施提高消毒效果。

(2)斜面检验法将常用的琼脂斜面培养基6管,放入接种箱(室)内。按无菌操作将其中3管的棉塞拔出,棉塞放在灭菌的培养皿内,琼脂斜面暴露30min后,再将棉塞通过火焰,塞回试管。未开口的琼脂斜面作为对照。然后将所有琼脂斜面置于30℃培养箱中培养48h,检查有无杂菌生长。如果斜面上不长菌落,则说明消毒效果较好,否则要采取措施提高消毒效果。

经过以上检查,如霉菌较多时,可先用5%石炭酸全面喷洒后,再用甲醛进行熏蒸;如细菌较多时,可采取用乳酸和甲醛交替熏蒸的办法,效果较好。


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