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如何选择合适的GST抗体?

2020.5.18

GST标签系统具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便,以及利于GST抗体制备等特点和优势。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到,也可以直接被位点特异性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的优点,商品化的GST融合蛋白表达体系以及GST标签抗体系统至今仍被广泛应用。用GST融合表达系统表达外源基因时,需要对融合表达的产物进行检测和纯化,这里面就包括了GST标签抗体的应用,如果选择一个最具性价比的GST抗体显得尤为重要。 

如何选择合适的GST抗体?

我们在选择GST标签抗体时,主要根据自己的需要,特别是实验应用上的需要。其中需要考虑的因素包括了,GST抗体的应用检测类型、GST抗体的克隆性及制备来源等。比如该GST抗体是否能用于Western Bloting的检测?是否可以用于免疫沉淀IP实验?我是否需要特异性更好的单克隆GST标签抗体?我是否需要考虑下是选择小鼠来源的还是兔来源的?

一般来说,应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大,而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体,而多克隆抗体则在亲和性上占有优势。 另外,该抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl GST抗体(假如其WB检测的稀释比率是1:5,000,最终使用液相当于500ml),要比效价低的1ml的GST抗体(假如WB检测的稀释比率是1:200,最终使用液相当于200ml)性价比更高。因此在选择抗体的时候,不但需要考虑抗体的量,还需要考虑抗体的效价,即不同应用的建议稀释比率。


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