SYPRO Orange 荧光染色实验

2019.3.29

实验材料	单向凝胶电泳分离后的蛋白样品
仪器、耗材	铝箔荧光扫描仪塑料容器
实验步骤	1.电泳结束后，将凝胶置于盛有试剂 A 的塑料容器中，试剂 A 的量要足够覆盖整块凝股。例如，一’块典型的 mini 胶（8 cmXIOcm 或 8 cmX8 cm) 需用 50~IOOml 的试剂 A。 2.用铝箔遮盖好容器，避免凝胶暴露在强光下。 3.室温下摇动凝胶 60 min。 4.移出试剂 A，留待步骤5 中使用。往盛有凝胶的容器中加入适量的试剂 B，室温下摇动 lmin。延长冲洗时间虽然会降低灵敏度，但背景也会减低。 5.用荧光扫描仪对凝胶进行扫描（SYPRO Orange 的最大激发光波长是 472nm，最大发射光波长是 570nm)。扫描完后，将凝胶放回试剂 A 中。 6.虽然荧光信号会随时间而降低，但凝胶在试剂 A 中还是可以保存几个星期。此外，也可以利用空气干燥凝胶法保存凝胶，尽管这样做同样会导致荧光信号的轻微减弱。至于空气干燥凝胶，需将凝胶放在两张湿的玻璃纸中间，拉紧玻璃纸，待胶静置于空气中变干。空气干燥后的凝胶可永久保存展开

实验材料

仪器、耗材

实验步骤

1.电泳结束后，将凝胶置于盛有试剂 A 的塑料容器中，试剂 A 的量要足够覆盖整块凝股。例如，一’块典型的 mini 胶（8 cmXIOcm 或 8 cmX8 cm) 需用 50~IOOml 的试剂 A。

2.用铝箔遮盖好容器，避免凝胶暴露在强光下。

3.室温下摇动凝胶 60 min。

4.移出试剂 A，留待步骤5 中使用。往盛有凝胶的容器中加入适量的试剂 B，室温下摇动 lmin。

延长冲洗时间虽然会降低灵敏度，但背景也会减低。

5.用荧光扫描仪对凝胶进行扫描（SYPRO Orange 的最大激发光波长是 472nm，最大发射光波长是 570nm)。扫描完后，将凝胶放回试剂 A 中。

6.虽然荧光信号会随时间而降低，但凝胶在试剂 A 中还是可以保存几个星期。