H I V的检测与分析——外周血中HIV的分离和定量检测
| 实验步骤 | 外 周 血 中 H IV 的 分 离 和 定 量 检 测 基 本 方 案 1 外 周 血 中 H IV 的培养以及通过 TCID 定量来测定其滴度注 ：所有的培养都在 37°C ，含 5 % 0 3 2 的加湿培养箱中进行。 材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)来 自 正 常 个 体（H I V -血清反应阴性）及 感 染 个 体（H I V -血清反应阳性）的全血 无菌 P B S ， p H 7.2，或 H B S S Ficoll-Hypaque 溶液 含 2 ug/p l 植 物 血 凝 素（P H A ) 或 5 % (V A 0 人 IL- 2 的 R P M I -I O 完全培养基 肝 素 钠 真 空 试 管（附 录 3 G ) Sorvall R T -6000 离 心 机 及 H -1000B 转 子（或与其相当的离心机和转子），并配备可以离心培养板的托架 50m l 聚丙烯离心管，无菌 2 4 孔微量滴定板，无 菌（Falcon) 1 . 将 H I V -血清反应阴性供者的全血收集到含有肝素钠（浓度< 2 0 U /ml) 的无菌真空 基 本 方 案 2 感 染 同 种 异 型 T 淋巴母细胞：原 代 分 离 PBMC 中 的 HIV材 料
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