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细菌培养常见的培养基及培养方法

2019.5.18

(一)培养基

培养基是供细菌生长用的,由人工方法将多种营养物质根据各种细菌的需要而组合成的混合营养基质。

培养基的基本成分有营养物质、凝固物质、抑制剂和指示剂。常用的营养物质有:蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、各种糖类、血液、无机盐、鸡蛋和动物血清、生长因子等。最常用凝固物质为琼脂100ml培养基中加入2~2.5g琼脂可制成固体培养基;100ml培养基中加入0.3~0.5g琼脂可制成半固体培养基。有时也使用明胶、卵白蛋白、血清等作为赋形剂。常用的抑制剂有胆盐、煌绿、玫瑰红酸、亚硫酸钠、亚硒酸钠、一些染料和某些抗生素。培养基中加入的指示剂有酚红、中性红、甲基红、酸性复红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝等酸碱指示剂和美蓝作为氧气指示剂。

根据其形状分为固体、液体和半固体培养基;按用途可分为基础培养基、增菌培养基、选择培养基、厌氧培养基、鉴别培养基等;按成分可分为合成培养基和天然培养基。

(二)细菌的培养方法

普通培养法  普通培养法是指需氧菌或兼性厌氧菌等在普通大气条件下的培养方法,又称需氧培养法。若用明胶培养基培养细菌,应22℃培养。
二氧化碳培养法  某些细菌,如脑膜炎奈瑟菌、布鲁菌等在初分离时,需在5~10%二氧化碳环境中才能良好生长。二氧化碳培养方法有以下几种:二氧化碳培养箱、烛缸法、化学法。

厌氧培养法  常用方法有厌氧罐法、气袋法和厌氧手套箱等。大多数厌氧菌的初代培养生长较慢,故厌氧培养在37℃至少应培养48h。如疑为放线菌则应延长72~96h。


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