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微生物接种方法之斜面接种法

2020.3.31

该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。

(1)左手平托两支试管,拇指按住试管的底部。外侧一支试管是斜面上长有菌苔的菌种试管,内侧一支是待接的空白斜面,两支试管的斜面同时向上。用右手将试管塞旋松,以便在接种时容易拔出。

(2)右手拿接种环(如握毛笔一样),在火焰上先将环端烧红灭菌,然后将有可能伸入试管的其余部位也过火灭菌.

(3)将两支试管的上端并齐,靠近火焰,用右手小指和掌心将两支试管的试管塞一并夹住拔出,试管塞仍夹在手中,然后让试管口缓缓过火焰。注意不得将试管塞随意丢于桌上受到沾污,试管口切勿烧得过烫以免炸裂。

(4)将已灼烧的接种环伸入外侧的菌种试管内。先把接种环的先端触及无菌苔的培养基上使其冷却(如果操作迅速,此时接种环尚未完全冷却)。再根据需要用接种环沾取一定量的菌苔,注意勿刮破培养基。将沾有菌苔的接种环迅速抽出试管,注意勿使接种环碰到管壁或管口上。

(5)迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管的底部,轻轻向上划线(直线或曲线,根据需要确定),勿划破培养基表面。

(6)接好种的斜面试管口再次过火焰,试管塞底部过火焰后立即塞入试管内。

(7)将沾有菌苔的接种环在火焰上烧红灭菌。先在内焰中烧灼,使其干燥后,再在外焰中烧红,以免菌苔骤热,会使菌体爆溅,造成污染。

(8)放下环后,再将试管塞旋紧,在试管外面上方距试管口2~3cm处贴上标签。

(9)28℃~37℃恒温培养。


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