色谱常见疑难杂症详解（一）

2020.2.29

小编为您带来色谱常见十四种使用问题的详细解答，赶快转发收藏吧!

　　1、用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决?

　　答：关于漂移问题：a、温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定;b、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等;c、柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡。

　　关于快速变化问题：a、流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定;b、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出;c、流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合。

　　2、色质联用中毛细柱的选择应注意什么问题?

　　答：柱效要高、热稳定性好、化学惰性强。

　　具体选择应注意：a、柱极性：根据分析样品选择不同极性的柱子进行分析;b、柱子内径：内径大小决定柱容量;c、液膜厚度：分析样品温度一不一样，对膜厚有不同要求，温度高液膜要厚，温度低液膜要薄;d、柱长度：柱越长，柱效越高，分离效果越好，但也存在吸附问题，柱子过长，分析时间长，因此要根据样品考虑柱子长度;e、外涂层(柱体)的选择;f、另外还有仪器型号、分析对象等因素。

　　3、液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?

　　答：a、筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子;b、存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子。

　　4、从那些方面可以简单判别毛细管柱子的热稳定性好坏?

　　答：a、分配容量(或容量因子)K：好的柱子在高温运行后，分配容量K不应有明显的下降，否则，说明柱子的热稳定性不好;b、理论塔板数n：热稳定性好的柱子经受高温后，理论塔板数应基本保持恒定;c、柱子的极性：热稳定性好的柱子，高温前后极性变化不大，具体表现为保留指数I值没有大的变化;d、噪声：热稳定性好的柱子在高温下使用后，噪声不能增加;e、柱子的去活层：毛细管柱子涂固定液前内部一般要用去活性试剂去活以增加惰性，质量好的毛细管柱子高温后，去活层不应该变化，表现在对强极性样品或酸碱性样品的吸附性不能增加。

　　5、为什么进样器内的玻璃衬套会对色谱行为造成影响?

　　答：进样器内的玻璃衬套主要有下列作用：a、提供一个温度均匀的汽化室，防止局部过热;b、玻璃的惰性不如不锈钢好，减少了在汽化期间样品分解的可能性;c、易于拆换清洗，以保持清洁的汽化室表面，一些痕量非挥发性组分会逐渐积累残存于汽化室，高温下会慢慢分解，使基流增加，噪声增大，通过清洗玻璃衬套可以消除这种影响;d、可根据需要选择管壁厚度及内径适宜的玻璃衬套，以改变汽化室的体积，而不用更换整个进样加热块。从以上几个方面可以知道玻璃衬套对色谱行为造成影响的原因。

　　6、毛细管色谱分流进样时，非线性分流的主要原因是什么?

　　答：a、进样器温度太低，样品汽化不完全，发生分级分流;b、进样器温度太高，某些组分可能发生热分解，也有的样品可能发生催化分解，或样品部分地被吸附在进样器内表面上;c、在分流点以前样品没有混合均匀或混合不充分;d、系统的进样垫，柱接头等地方漏气。

　　7、HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法?

　　答：a、样品量不足：解决办法为增加样品量;b、样品未从柱子中流出：可根据样品的化学性质改变流动相或柱子;c、样品与检测器不匹配：根据样品化学性质调整波长或改换检测器;d、检测器衰减太多：调整衰减即可;e、检测器时间常数太大：解决办法为降低时间参数;f、检测器池窗污染：解决办法为清洗池窗;g、检测池中有气泡：解决办法为排气;h、记录仪测压范围不当：调整电压范围即可;i、流动相流量不合适：调整流速即可。检测器与记录仪超出校正曲线：解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。

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