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SPA 在免疫组化中的应用

2020.8.18

实验方法原理

由于 SPA 能结合 IgG 的 Fc 段,因此就成为天然的抗 IgG,酶标记的 SPA 可代替酶标记的 IgG 抗血清,从而测定和定位组织内的 IgG 或免疫复合物。

实验材料 石蜡切片

试剂、试剂盒 H2O2TBS第一抗体SPA-HRPDAB二甲苯乙醇树胶

实验步骤

1. 石蜡切片常规脱蜡至水。


2. 3% H2O2 处理 15 min,以抑制内源性过氧化物酶。


3. TBS 洗 3×3 min。


4. 加第一抗体,孵育 30~60 min,或 4℃ 过夜。


5. TBS 洗 3×3 min。


6. 加适当的稀释的 SPA-HRP(1:100~1:400),孵育 30~60 min。


7. TBS 洗 3×3 min。


8. DAB 显色 5~10 min。


9. 复染、脱水、封片。


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