SPA 在免疫组化中的应用
实验方法原理
由于 SPA 能结合 IgG 的 Fc 段,因此就成为天然的抗 IgG,酶标记的 SPA 可代替酶标记的 IgG 抗血清,从而测定和定位组织内的 IgG 或免疫复合物。
实验材料 石蜡切片
试剂、试剂盒 H2O2TBS第一抗体SPA-HRPDAB二甲苯乙醇树胶
实验步骤
1. 石蜡切片常规脱蜡至水。
2. 3% H2O2 处理 15 min,以抑制内源性过氧化物酶。
3. TBS 洗 3×3 min。
4. 加第一抗体,孵育 30~60 min,或 4℃ 过夜。
5. TBS 洗 3×3 min。
6. 加适当的稀释的 SPA-HRP(1:100~1:400),孵育 30~60 min。
7. TBS 洗 3×3 min。
8. DAB 显色 5~10 min。
9. 复染、脱水、封片。
推荐