什么是不对称 PCR？原理是什么？
不对称 PCR 的基本原理是采用不等量的一对引物,经若干次循环后,低浓度的引物被消耗尽,以后的循环只产生高浓度引物的延伸产物,结果产生大量的单链 DNA(ssDNA)。这两种引物分别称为限制性引物和非限制性引物,其最佳比例一般是1/50～1/100,因为 PCR 反应中使用的两种引物的浓度不同,因此称为不对称PCR。
不对称 PCR 主要为测序制备 ssDNA,其优点是不必在测序之前除去剩余引物,因为量很少的限制性引物已经耗尽。多数学者认为,用 cDNA 经不对称 PCR 进行 DNA 序列分析是研究真核 DNA 外显子的好方法。
推荐
