用UNIFI鉴定未知中药片剂中的化学成分及推测药材（一）
乔立瑞1、Rob Lewis2、Alex Hooper2、James Morphet2、谭晓杰1、Kate Yu3
1、沃特世科技（上海）有限公司，上海，中国
2、沃特世公司质谱技术中心，曼彻斯特，英国
3、沃特世公司，马塞诸塞州米尔福德市，美国
运用超高效液相色谱（ACQUITY UPLC® I-Class）、四级杆飞行时间质谱 （Xevo® G2-S QTof）及UNIFI®天然产物整体解决方案鉴定未知中药片剂中的化学成分并推测其所含药材。这一UNIFI对未知物组分鉴定和可能药材推测的整体工作流程大大提高了未知中药体系组分定性工作的准确性及效率。
背景介绍:
中药是一个极其复杂的物质体系，其发挥作用的物质基础主要是药材中的化学成分。应用纪要"使用UNIFI整体解决方案分析绿茶中的化学组分"（文献编号：720004840zh）中，我们已经阐述了如何应用UNIFI整体解决方案结合中药数据库来快速鉴定已知药材样品中的化学成分。对此类样品只需从UNIFI中药数据库导入相关的药材成分，并以它们为搜索目标对所得数据进行比对从而得出匹配成分列表并加以确证。此工作流程思路明确，步骤相对简单。
然而，人们在实际工作中往往需要对一些完全未知的样品进行化学成分分析，并要推测其中可能含有的中药材，这类工作的难度就很大，有时甚至不知从何入手。由于已知背景信息近乎于零，运用目前最常见的液质联用仪的分析即使得到大量数据，如何从庞大信息中缩小目标范围快速找到有用信息仍是所有科研人员共同面对的最大挑战。
对于未知中药产品的组分研究，传统的工作流程是：研究人员手工提取每个色谱峰，通过精确分子量来推导可能的分子式。然后根据分子式检索在线数据库，并且需要通过相关的二级碎片推导其可能的裂解途径，进而确定结构。该研究思路由点到面，这一系列环节中，不仅很多步骤需要研究人员的直接介入，同时对研究人员的化学背景要求很高，需要不断从信息的海洋中寻找答案。
UNIFI天然产物整体解决方案提出了一套新的全方位解决问题的思路。它以超高效液相色谱 (ACQUITY UPLC I-Class) 与四级杆飞行时间质谱 （Xevo G2-S QTof）为基础，对样品进行非数据依赖的MSE数据采集，将所得数据与UNIFI中药数据库进行比对，所匹配成分结构以其相应碎片经MassFragment™确证，最终通过预设的工作流程模版自动显示出所鉴定样品组分的详细信息。
本应用纪要便以未知物中药片剂为例阐述了如何采用UNIFI天然产物整体解决方案鉴定未知样品中的化学成分并推测其中可能的药材。
关键词:
未知中药产品成分分析、未知中药产品药材推测与确证、UNIFI 天然产物整体解决方案、UNIFI 中药数据库、UPLC/QTof MS、 MSE、UNIFI 天然产物工作流程、丹参、三七
实验条件：
样品处理：
将未知中药片剂两片，去包衣，研成粉末状，取500 mg溶解于50 mL MeOH:H2O（3:1），超声溶解5min，并以0. 45 μm薄膜过滤，备用。
液相色谱条件：
仪器： ACQUITY UPLC I-Class with FTN Sample Manager
色谱柱： ACQUITY UPLC HSS T3， 2.1 x 100 mm， 1.8 μm， 40℃
样品室温度： 15 ℃
流动相 A： 水（0.1% 甲酸）
流动相B：乙腈
梯度：
时间 | 流速 （ml/min） | 溶剂A （%） | 溶剂B（%） | 曲线 |
0 | 0.6 | 90 | 10 | 开始 |
1 | 0.6 | 90 | 10 | 6 |
12 | 0.6 | 5 | 95 | 6 |
14 | 0.6 | 0 | 100 | 1 |
17 | 0.6 | 90 | 10 | 1 |
