电穿孔的技术简介
电穿孔或电渗透是微生物学技术，其中将电场施加到细胞以增加细胞膜的渗透性，从而允许化学品，药物或DNA被引入细胞。在微生物学中，电穿孔过程通常用于通过引入新的编码DNA来转化细菌，酵母或植物原生质体。如果细菌和质粒混合在一起后，质粒可以在电穿孔后转移到细菌中，尽管取决于正在转移的细胞穿透肽或CellSqueeze也可以被使用。电穿孔通过在电穿孔比色杯（1.0-1.5kV，250-750V / cm）中传递数千伏特穿过1-2毫米悬浮细胞的距离而起作用。之后，细胞必须小心处理，直到它们有机会分裂，产生含有再生质粒的新细胞。这一过程比化学转化效率大约高出十倍。
电穿孔对于将外源基因导入组织培养细胞，特别是哺乳动物细胞也是高效的。例如，它被用于生产敲除小鼠的过程中，以及在肿瘤治疗，基因治疗和基于细胞的治疗中。将外源DNA导入真核细胞的过程称为转染。电穿孔对于使用电穿孔比色皿转染悬浮液中的细胞是非常有效的。电穿孔已经被证明有效用于体内组织，用于子宫内应用以及卵内转染。贴壁细胞也可以被转染使用电穿孔，为研究人员提供了一种替代方案，在转染前将其细胞进行胰蛋白酶消化。然而，电穿孔的一个缺点是在这个过程之后，超过7000个基因的基因表达可能受到影响。这可能会导致研究中的基因表达必须控制，以确保准确和精确的结果的问题。
细胞融合不仅是细胞生物学中一个必不可少的过程，而且作为生物技术和医学的一种有用的方法。人工诱导融合可用于研究和治疗不同的疾病，如糖尿病再生中枢神经系统的轴突并产生具有所需特性的细胞，例如用于癌症免疫治疗的细胞疫苗。然而，细胞融合的第一和最公知的应用是生产杂交瘤技术，其中杂交细胞系（杂交瘤）由融合特异性的产生抗体的B淋巴细胞与骨髓瘤形成的单克隆抗体（ B淋巴细胞癌）细胞系。
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