用 Hoechst33258 测定DNA实验
实验方法原理 | 在缓冲液中匀浆细胞或组织,继用超声处理。以一定量的细胞悬液与Hoechst33258混匀,测定其荧光。 |
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实验步骤 | 材料 非无菌: 缓冲液:0.05mol/LNaPO4;2.0mol/L NaCl,pH7.4 , 含 2 X l0-3 mol/L EDTA 。 Hoechst33258;缓冲液中,100ng/ml 以上的 DNA 用 lug/ml,10~100ng/ml 则用 0.lug/ml。 操作步骤 1. 在缓冲液中用 Potter 匀浆器匀浆细胞,1X 105 个细胞/ml , 1min。 2. 超声处理 30s。 3. 用 Hoechst 33258 和缓冲液按 1 : 10 稀释细胞。 4. 在 492nm,激发为 356nm 处检测荧光辐射,以小牛胸腺 DNA 作为标准。 |
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