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DNA纤维荧光原位杂交技术(DNA fiber- FISH)介绍

2022.6.17

FISH的分辨率取决于载体DNA的浓缩程度,如何提高分辨率一直是一个重要课题。Wiegant等和Heng等首先利用化学方法对染色体进行线性化,再以此为载体进行FISH,使其分辨率显著提高,这就是最初的纤维-FISH。纤维-FISH应用各种不同技术,将待研究细胞的全部遗传物质即DNA在载玻片上制备出DNA纤维,用不同颜色荧光物质标记的探针与DNA纤维杂交,在荧光显微镜下观察结果并进行分析。

纤维-FISH的关键就在于制备高质量的线性DNA纤维。理想制备出的DNA长度应与完全自然伸展的DNA纤维相近,并且.断裂点应尽可能少。近年来已发展了多种制备DNA纤维的方法。纤维-FISH能进行定量分析,所需模板量少且要求不高,具有分辨率高和灵敏度高等优点。因此,纤维-FISH在染色体图谱绘制,基因重组研究以及临床染色体基因序列检测工作中起着十分重要的作用。


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