Western Blot实验（一）
大家都知道Western Blot时间周期较长，大致可以分为忙碌的第一天，和心痛的第二天，像极了爱情。人生若只如初见，何事秋风悲画扇。经历转瞬即逝的新手曙光后，便进入漫长的黑夜。
第一天，从最一步的配胶，到最后一步的孵育膜都极细心像极了爱情的萌芽期，需要精心的呵护。第二天经过繁琐的洗膜，孵二抗，洗膜，都需要耐心，之后便迎来了验证奇迹的一刻：显影，皆大欢喜或者一切皆空。像极经历爱情的磨合期，也有两个极端走向，婚姻的殿堂，或者以分手草草了事。
大多数实验室常用化学发光（ECL）方式，品牌，仪器众多，当然结果也良莠不齐。顿时回忆起当时做实验的点点滴滴，前面的工作繁琐而充实，一天下来觉得很满足，第二天既期待又紧张，期待有个完美的结果，但又担心事与愿违。大家怀揣着一颗忐忑不安的心走近暗室或者成像仪。随后便传来“为啥背景那么深，为啥没有目的条带，为啥分子量不对，被裁掉了…”一系列咆哮不绝于耳，大家都习以为常，相视一笑，接着做自己的事。经过忙碌的两天，只能被迫接受这种情况吗？
来比较下胶片和化学发光：
化学发光的动态范围大于3.3OD，而胶片显影的动态范围仅有1.2OD，由此可以看出化学显影优于古老的胶片显影。
对于那些蛋白分子量接近，化学显影背景深的又该如何？
近红外荧光标记是western blot最理想工具
目前国内实验室使用的仍是化学发光，而SCI期刊中则有很多使用荧光标记WB，为了紧跟时代的步伐，我们需要引进和创新。那荧光标记的好处在哪？
化学发光的信号是动态的，二抗是酶标记，属于酶促动力学反应，信号随时间的变化而变化，信号不与目标蛋白浓度成线性比例关系。而荧光信号荧光是静态信号，不会随着时间的变化而变化，信号持久，可达到精准定量。
PVDF膜或者NC膜在可见光区会产生自发荧光，而在近红外区是几乎没有自发荧光，进而消除了背景的干扰。选择在近红外区自发荧光较低的转印膜得到的，效果更好，背景更加干净，信噪比更高。
化学发光和荧光标记western blot 各有所长，而Azure c600多功能分子成像系统兼顾化学发光的高灵敏和荧光检测的宽动态范围和精准定量，满足实验室各种需求。
