HPLC测定饮料中的7种塑化剂
图1. 七种混标色谱图。
本文采用高效液相色谱-梯度洗脱法分析了7种邻苯二甲酸酯类物质，并对某市售饮料进行了测定。采用该方法，标样的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别低于0.11%、0.5%，7种邻苯二甲酸酯类物质检测限均低于0.15μg/ml。此方法简便、准确、重现性好，适用于常规监督检验。
自2011年6月份以来，台湾塑化剂事件愈演愈烈，在全国成为继三聚氰胺事件后的又一次重大食品安全危机。塑化剂是指“邻苯二甲酸（2-乙基己基）二酯（DEHP）”为代表的邻苯二甲酸酯类的工业添加剂，若长期食用可能引起生殖系统异常，甚至造成畸胎、癌症。塑化剂种类很多，但最常被使用的是DEHP[邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯]，它主要用在PVC（聚氯乙烯）塑料制品中，例如保鲜膜、食品包装、玩具等。很多医用塑料用品，例如导管、输液袋等等，也都含有这种物质。它在塑料制品中的含量变化范围很大，从1%~40%都有可能。这次台湾饮料安全事件中的主角，正是DEHP这种物质。
邻苯二甲酸酯类化合物的测定方法有GC-MS法、HPLC法，本文建立了同时测定7种邻苯二甲酸酯类（邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸苄丁酯BBP，邻苯二甲酸酯二丁酯DBP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二庚酯DHP，邻苯二甲酸二乙基己基酯-DEHP）物质的高效液相色谱方法，同时对仪器测定7种标样的重现性进行了测试，并通过不断稀释的方法得到了7种标样的最低检出限值。采用实验室常规仪器，方法简便、灵敏、准确，可用于塑化剂的实际检验工作中。
实验部分
仪器与试剂
高效液相色谱仪：日立L-2000系列，包括四元梯度泵L-2130、自动进样器L-2200、紫外检测器L-2400、柱温箱L-2300、色谱工作站。
7种标准品纯度不低于95%，乙腈、甲醇、正己烷均为色谱纯，水为超纯水。
色谱分析条件
色谱柱：Hitachi LaChrom C18 （5μm）4.6mmI.D.x250mm；流速：1.0 ml/min；柱温：30℃；波长：224nm；进样体积：20μl；流动相：A为H2O，B为CH3CN。
实验方法
分别准确称取一定量的7种标准物质于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容，经0.45μm过滤后上机测试。
准确量取50ml实际样品，分3次加入50ml正己烷萃取，收集正己烷层，旋蒸近干，加入1ml甲醇溶解，经0.45μm过滤后上机测试。
结果与讨论
流动相梯度的确认
本文选用了乙腈和水的梯度洗脱检测7种邻苯二甲酸酯类物质，在此梯度条件下，可使7种组分间保持合适的分离度，并且与干扰物质完全分离，可达到较低的检出限。
检出限
采用逐步稀释的方法配置一系列不同浓度的混合标样，每个浓度进样3次，通过3倍信噪比计算出来7种邻苯二甲酸酯类物质的检出限（见表１）。
重复性试验
对7种邻苯二甲酸酯类物质混合标样重复进样6次，保留时间、峰面积统计结果见表２和表３。
实际样品检测
市售饮料经正己烷萃取后测定，实验结果见图3。
结语
采用日立L-2000液相色谱仪，配四元梯度系统，很好的分离并检测了7种邻苯二甲酸酯类物质，并得到了较低的检测限；由于日立L-2000系列四元梯度系统具有的“泵前合流，泵后混合”的ZL技术使流动相在泵后高压部分进行混合，不容易产生气泡，同时又有极高的梯度精度，即使采用梯度洗脱，仍能得到很好的重现性，该方法简单易用，特别适合大量样品的常规分析检测。
