测序反应实验

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测序反应实验

2019.9.12

试剂、试剂盒	循环测序试剂盒引物和模板
仪器、耗材	薄壁 PCR 管热循环仪 GeneAmpPCRSystem9700 仪
实验步骤	一、材料 1. 缓冲液和溶液 ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 或其他循环测序试剂盒 2. 核酸和寡核苷酸引物和模板 3. 特殊设备 DNA 扩增用薄壁 PCR 管热循环仪，GeneAmp PCR System9700(Applied Biosystems) 仪或相当产品二、方法 1. 将适量（如上所述）的引物和模板加入到 PCR 管中。 2. 每管加入 4ul Terminator Ready Reaction mix。这是说明书中推荐用董的一半，这一用董已经足够，而且节省试剂。 3. 用去离子水补至 20ul, 混匀，稍离心。 4. 在 GeneAmp PCR System 9700(Applied Biosystems) 或相当产品的仪器上，执行下列程序。 5. 上步反应结束后，反应产物可立即纯化或-20°C 保存以备将来纯化。展开

试剂、试剂盒

循环测序试剂盒引物和模板

仪器、耗材

薄壁 PCR 管热循环仪 GeneAmpPCRSystem9700 仪

实验步骤

一、材料

1. 缓冲液和溶液

ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 或其他循环测序试剂盒

2. 核酸和寡核苷酸

引物和模板

3. 特殊设备

DNA 扩增用薄壁 PCR 管

热循环仪，GeneAmp PCR System9700(Applied Biosystems) 仪或相当产品

二、方法

1. 将适量（如上所述）的引物和模板加入到 PCR 管中。

2. 每管加入 4ul Terminator Ready Reaction mix。

这是说明书中推荐用董的一半，这一用董已经足够，而且节省试剂。

3. 用去离子水补至 20ul, 混匀，稍离心。

4. 在 GeneAmp PCR System 9700(Applied Biosystems) 或相当产品的仪器上，执行下列程序。

5. 上步反应结束后，反应产物可立即纯化或-20°C 保存以备将来纯化。

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