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使用液氮罐储存细胞样品的具体方法是什么?

2020.3.26

一 使用液氮罐储存细胞样品的具体方法是什么?程序降温的具体步骤

1.预先配制冻存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷;

2.用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽可能温和);

3.再次用完全培养液悬浮细胞,将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀。

4.在每支冻存管中加入1ml细胞液,密封后标记冻存细胞名称和冻存日期。

5.冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力

细胞冻存有两种方法:传统的方法是利用冷存管处于4℃、 -20℃、 -80℃三温区保存,程序降温方法是利用程序降温盒设定程序由室温降低至-80℃,zui后再放置到液氮罐中长期保存。

 二 液氮罐与-86度超低温冰箱保存细胞的区别?

首先,冻存的细胞,温度越低,保存的时间越长,像哺乳类细胞冻-80度,存放于-86度超低温冰箱内,保存半年没问题,但是如果要保存时间更长,或者长久保存,就必须要用液氮罐来储存,-196度超低温储存。


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