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细胞冻存液氮罐的具体操作步骤和细胞复苏流程

2021.5.29

细胞冻存液氮罐的具体操作步骤:

  1、培养皿或培养瓶中细胞按常规方法消化,或分离获得原代细胞后,收集于离心管中。

  2、使用离心机离心,去除上清,收集细胞沉淀。

  3、根据细胞生长密度加入适量的LiveCyteTM细胞冻存液进行重悬,充分混匀。

  4、将细胞悬液分装至冻存管中,直接放置于-80°C冰箱保存。24小时后可移入液氮长期保存(可选)。

  细胞冻存液氮罐的细胞复苏流程:

  1、从-80°C冰箱或液氮罐中取出细胞。

  2、迅速放入37°C水浴,并不时摇动,在3分钟之内使其完全融化。

  3、在冻存管中加入少量完全培养基,再将细胞混合液移入含有该细胞完全培养基的离心管中,样品和培养基比例为1:10,然后轻轻吹打,混合均匀。

  4、离心后去除上清,收集细胞沉淀。

  5、轻轻弹松细胞沉淀,加入适量培养液后接种于培养瓶或培养皿中,轻轻晃动使细胞分布均匀,置于37℃孵箱中培养。




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