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秦皮中七叶苷、七叶内酯的提取、分离和鉴定—乙醇提取法

2019.3.30
实验材料

秦皮粗粉1

试剂、试剂盒

乙醇氯仿硫酸钠乙酸乙酯甲醇浓氨水氯化铁重氮化对硝基苯胺喷雾蒸馏水

仪器、耗材

索氏提取器回流瓶分液漏斗萃取瓶玻璃棒试管硅胶GUV254灯

秦皮为本樨科白蜡树属植物白蜡树(Fraxinus Chinensis Poxb)或苦沥白蜡树(F.rhynchophylla Hance)或小叶白蜡树(F.bungeana DC)的树皮,味苦,性微寒。具有清热、燥湿、收涩作用。主治温热痢疾、目赤肿瘤等症。



秦皮中含有多种内酯类成分及皂苷、鞣质等,其中主要有七叶苷、七叶内酯、秦皮苷及秦皮素等。多有抗菌消炎的生理活性,七叶内酯对细菌性痢疾、急性肠炎有较好治疗效果,兼有退热作用,毒付作用小,几无苦味。适于小儿服用。



秦皮中主要成分的结构及性质


1.七叶苷(esculin),又叫马粟树皮苷:白色粉末状结晶,mp205~206℃。易溶于热水(1:15),可溶于乙醇(1:24),微溶于冷水(1:610),难溶于乙酸乙酯,不溶于乙醚、氯仿。在稀酸中可水解。水溶液中有蓝色荧光。




2.七叶内酯(esculetin):黄色针状结晶,mp276℃。易溶于沸乙醇及氢氧化钠溶液,可溶于乙酸乙酯,稍溶于沸水,几不溶于乙醚、氯仿。




3.秦皮苷(fraxin):mp205℃。




4.秦皮素(fraxetin):mp227~228℃。




实验原理


七叶苷、七叶内酯均能溶于沸乙醇,可用沸乙醇将二者提取出来,再利用二者在乙酸乙酯中的溶解性不同而分离之。



实验方法


(一)提取:取秦皮粗粉150g于索氏提取器中,加400ml乙醇回流10-12小时,得乙醇提取液,减压回收溶剂至浸膏状,即得总提取物。


(二)分离:在上述浸膏中加40ml水加热溶之。移于分液漏斗中,以等体积氯仿萃取二次,将氯仿萃取过的水层蒸去残留氯仿后加等积乙酸乙酯萃取二次,合并乙酸乙酯液,以无水硫酸钠脱水,减压回收溶剂至干,残留物溶于温热甲醇中,浓缩至适量,放置析晶,即有黄色针状结晶析出。滤出结晶。甲醇、水反复重结晶,即得七叶内酯。



将乙酸乙酯萃取过的水层浓缩至适量,放置析晶,即有微黄色晶体析出。滤出结晶。以甲醇,水反复重结晶,即得七叶苷。



(三)鉴定:


1.化学检识:取七叶苷、七叶内酯各少许分别置试管中,加乙醇1ml溶解。加1%FeCl3溶液2-3滴,显暗绿色,再滴加浓氨水3滴,加水6ml,日光下观察显深红色。


2.薄层鉴定:


吸附剂:硅胶G


样品:七叶苷、七叶内酯标准品及自制七叶苷﹑七叶内酯的醇溶液。


展开剂:甲醇-甲酸乙酯-甲苯(1:4:5)


显色:1)UV254灯下观察,七叶苷为灰色荧光,七叶内酯为灰褐色。



2)以重氮化对硝基苯胺喷雾显色,七叶苷和七叶内酯均呈玛瑙色。


结果:七叶苷Rf=0. 04,七叶内酯Rf=0.28



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