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实验分析仪器--液质联用中液相色谱的性能指标

2022.1.25

1、泵的最大工作压力 

这是指柱塞泵能达到的最大的耐压值,需要提供多高的压力给输液主要取决于色柱填料的粒径,当然,在达到最佳柱效的前提下在实际操作中还与输送液体的性质,流量、柱温等因素有关,对于常规的HPLC/MS测试来说,使用5mm或更高粒径的填料则15-30MPa的压力可以满足工作要求,但如果使用更低的粒径,如3mm,输液应在更高的压力下工作,所以,一般建议泵的最大耐压值在48MPa左右为好,但是,对手ULPC/MS来说,由于使用的色谱柱的粒径一般在1.7-1.9mm,也就是需按范第姆特关系式,在低于2mm时进入了ULPC的技术操作范围,故泵的最大耐压值一般要达到100MPa。

 

2、压力脉动

单柱塞泵的来回移动实现流动相的吸入和泵出,并依赖运动的频率控制流动相输出的流量。柱塞泵的冲程有两个极限位置,由此产生输出的脉冲,往复双柱塞泵依靠两个柱塞杆来回移动,通过它们间的时间差达到流动相输出的互补,使脉冲降到最低,实现流动相流量的平稳,当一定流量的流动相通过有负载的色谱柱时,在色谱柱的接头处形成了相应的压力,尽管有双柱塞泵的补偿,实际上输出的压力还是有上下起伏,这个起伏被称为压力脉动,在1mL/min流量条件下,一般允许压力脉冲<0.5%,压力脉动越小则在API源中喷雾的状态越好,输出的离子流越稳定。

 

3、流量范围 

指 HPLC/MS联用时HPLC流量的工作范围。单纯使用HPLC时流量范围通常在0.001-10mL/min,但当与质谱联用时受到API源接口的限制,其流量一般不超过  1mL/min﹙ESI源﹚和不超过2mL/min﹙APCI源﹚,对于UPLC/MS联用,通常使用的流量范围为0.001-0.5mL/min。

 

4、流量精密度 

指HPLC流量值的重现性,通常在1mL/min条件下,相对标准偏差RSD<0.1%。

 

5、流量准确度 

在液相色谱中流量准确度即指流量的正确度。在标称的流量1mL/min条件下,RSD<士1%。

 

6、梯度混合精密度

在液相色谱中指的是梯度混合重现性,在指定的混合体积条件下﹙1mL/min﹚条件下,RSD<0.15%。

 

7、梯度混合准确度

在液相色谱中梯度混合准确度即指梯度混合的正确度,在标称的混合比例下﹙1mL/min﹚,RSD<士0.5%。

 

8、梯度延迟体积 

指梯度洗脱中,形成梯度处与色谱入口之间的体积,高压混合系统包括混合室,连接管和注射器,低压混合系统还包括泵头及其管线。注射器如配用loop时,后者也应包括在内,梯度延迟体积的典型值为1-5mL,但也能低于0.5mL,目前,在二元高压混合系统中一般低于0.2mL,ULPC系统则更低。过大的延迟体积对分离的效果有一定的影响,延迟体积越小越有利于减小柱外体积,并能高效地进行梯度优化工作,且可缩短柱平衡时间,实现高通量分析。

 

9、动进样器的进样量精密度

在液相色谱中是指自动进样器进样量的重现性,在10mL进样量的范围内,RSD<0. 25%。

 

10、自动进样量的样品污染度

自动进样器在连续进样时上一针的残留量,一般<0.005%


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