1分钟了解占据等温PCR三成市场的NEAR技术
小背景
切刻酶辅助扩增反应，可以有以下几种称呼：
NEAR，nicking enzyme-assisted reaction；
NEAA，nicking enzyme-assisted amplification；
NEMA, nicking enzyme-mediated amplification；
EXPAR，Exponential amplification reaction。
该技术由Ionian Technologies, Inc.于2000年发明；2010年被Alere收购；2017年被雅培收购。是的，该技术就是雅培推出5min获得新冠检测结果ID NOW的核心技术。
NEAR技术目前已经得到比较广泛的应用
图片来源：C.Qian,et al./Analytica Chimica Acta, 2019
该系统的核心组成：
Nt.BstNBI切刻内切酶
能特意的识别DNA序列5’-GAGTC-3’/5’-GACTC-3’,并且仅仅在距离识别位点3’端4个核苷酸的位置切割含有识别序列的单链DNA。 切刻内切酶，最早发现于1988年，后续又有不同的切刻内切酶被发现，以及工程菌被开发。不同的内切酶识别序列和切割位置可能会有不同。如下图，是列举的部分切刻内切酶相关信息。
部分切刻内切酶相关信息
图片来源：C.Qian,et al./Analytica Chimica Acta, 2019
链置换DNA聚合酶
该聚合酶可以以DNA双链的一条链为模板进行新链的合成，新合成的链替换旧双链中的序列相同的旧链，即链置换。 可以选择不同的具有相同功能的链置换DNA聚合酶，如Bst、Klenow、Vent等DNA聚合酶。
引物
操作原理：
NEAR技术原理模式图
注意事宜：
基于核心原理，可以有不同的展现形式，万变不离其宗！
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