聚谷氨酸含量测定
实验概要
微生物发酵聚谷氨酸 标准曲线法
实验步骤
1 标准曲线的绘制
1.1 准确吸取聚谷氨酸标准溶液1mL于50ml容量瓶中。
1.2 分别加入0.5mL 0.01mol/L EDTA溶液,1mL Tris-HCl溶液,10mL0.5%十二烷基二甲基苄基氯化铵水溶液,用水稀释至刻度,摇匀,放入30℃恒温水浴中3min。
1.3 在400nm处用25px吸收池,以不添加十二烷基二甲基苄基氯化铵试样作为空白对照,测定吸光度。以吸光度为纵坐标,聚谷氨酸浓度(单位:mg/ml)为横坐标绘制标准曲线。
2 保肥思中聚谷氨酸含量测定
2.1 测定步骤
准确称取保肥思0.1g,加水溶解,定容至100mL,经滤纸过滤,量取滤液10ml加入50ml容量瓶,按照步骤4.1.2操作,于400nm下测定吸光度,以不添加十二烷基二甲基苄基氯化铵试样作为空白对照,对照标准曲线,计算保肥思中聚谷氨酸含量。
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