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动物细胞的基本形态观察和显微测量

2019.4.18

实验概要

制备不同细胞的临时制片,观察、了解细胞的基本形态,学会使用测微尺,通过测量对红细胞的进化进行分析。

实验原理

1.  细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同特点,在分化程度较高的细胞更为明显,这种合理性是生物漫长进化过程所形成的。例如:具有收缩机能的肌细胞伸展为细长形;具有感受刺激和传导冲动机能的神经细胞有长短不一的树枝状突起;游离的血细胞为圆形、椭圆形或圆饼形。不论细胞的形状如何,细胞的结构一般分为三大部分:细胞膜、细胞质和细胞核。但也有例外。例如:哺乳类红细胞成熟时细胞核消失。

2.  测微尺分目镜测微尺和镜台测微尺,两尺配合使用。目镜测微尺是一个放在目镜像平面上的玻璃圆片。圆片中央刻有一条直线,此线被分为若干格,每格代表的长度随不同物镜的放大倍数而异。因此,用前必须测定。镜台测微尺是在一个载片中央封固的尺,长1  毫米(1000μm),被分为100 格,每格长度是10 微米。

主要试剂

1. 1%甲苯胺兰

2. 1%甲基兰

3. Ringer 氏液(两栖类用)

主要设备

1. 配有目镜测微尺的显微镜一台

2. 载片十张

3. 盖片三张

4. 吸水纸

5. 手术器材一套

6. 解剖盘一个

7. 镜台测微尺一个

8. 小平皿一个

9. 牙签

实验材料

蟾蜍一只,人血液一滴。

实验步骤

1.制备蟾蜍脊髓压片观察脊髓前角运动神经细胞。

取蟾蜍一只,破坏脑和脊髓,在口裂处剪去头部,除去延脑,剪开椎管,可见乳白色脊髓,取下脊髓放在平皿内,用Ringer  氏液洗去血液后放在载片上,剪碎。将另一载片压在脊髓碎块上,用力挤压。将上面的载片取下即可得到压片。在压片上滴一滴甲苯胺兰染液,染色10  分钟,盖上盖片,吸去多余染液。在显微镜下观察,染色较深的小细胞是神经胶质细胞。染成兰紫色的、大的、有多个突起的细胞是脊髓前角运动神经细胞,胞体呈三角形或星形,中央有一个圆形细胞核,内有一个核仁(参照照片)。

2.蟾蜍骨骼肌细胞的剥离与观察

剪开蟾蜍腿部皮肤,剪下一小块肌肉,放在载片上,用镊子和解剖针剥离肌肉块成为肌束,继续剥离,可得到很细的肌纤维(肌细胞)。尽可能拉直肌纤维。在显微镜下观察,肌细胞为细长形,可见折光不同的横纹,每个肌细胞有多个核,分布于细胞的周边(参照照片)。

3.蟾蜍肝脏压片的制备与观察

剪开蟾蜍腹腔,取一小块(约2~3mm 3)肝放在平皿内,用Ringer 氏液洗净,用镊子轻压将肝中的血挤出。然后放在载片上,制片方法同脊髓压片。染色用甲基兰。显微镜下观察可见肝细胞核染成兰色,肝细胞紧密排列,挤成多角形(参照照片)。

4.蟾蜍血涂片的制备与观察

取一滴蟾蜍血液,靠近一端滴在载片上.将另一载片的一端呈45°角紧贴在血滴的前缘,均匀用力向前推,使血液在载片上形成均匀的薄层。(图)。晾干。显微镜观察可见蟾蜍红细胞为椭球形,有核。白细胞数目少,为圆形。

 

图血涂片的制备

5.人血涂片的制备与观察

取人血一滴,制片方法同上。显微镜观察可见人红细胞为凹圆盘形,无核。自细胞数目少,为圆形。

6.人口腔上皮细胞标本的制备与观察

用牙签刮取口腔上皮细胞均匀地涂在载片上(不可反复涂沫),滴一滴甲苯胺兰染液,染色5 分钟,盖上盖片,吸去多余染液。显微镜下观察可见复盖口腔表面的上皮细胞为扁平椭圆形,中央有椭圆形核,染成兰色。

7.将镜台测微尺放在显微镜的载物台上夹好,小心转动目镜测微尺和移动镜台测微尺使两尺平行,记录镜台测微尺若干格所对应的目镜测微尺的格数。

8.求出目镜测微尺每格代表的长度。

附    件   (共1个附件,占51KB)

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