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细胞冻存的基本原理

2021.6.03

细胞代谢过程需要各种蛋白酶的参与,而这些蛋白酶在环境温度低于-70℃时会集体罢工,低温贮藏的目的是通过超低温使细胞代谢活动近乎停止。细胞因此进入休眠状态,使细胞“不会老”,所以可以长期保存。

因为冻融过程对所有细胞和组织都是有一定伤害的,因此,需要开发出有效的技术来防止细胞死亡和损伤。
  低温保护剂可保护细胞不受细胞内冰冻影响,目前多采用DMSO,甘油,乙二醇和丙二醇等渗透型低温保护剂。它们的作用机制包括:自由进入细胞,取代水,使冰点下降,充当盐的二次溶剂,提高细胞膜对水的通透性。

但是,部分低温保护剂在缓慢冷冻过程中虽然会保护细胞,却也会引起细胞毒性,尤其是在室温下。因此,在标准的自制冻存液中,会含有血清,因为血清可以降低细胞毒性。但,血清并不是完美的成分:

 那么有无动物源成分替换物吗?

甲基纤维素也被认为是细胞冷冻保存的保护剂,所以可作为胎牛血清的替代物。

优势:

  • 化学成分明确

  • 有保护性




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