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如何提细胞的组蛋白做western blot

2022.7.04

你的意思就是提取核蛋白,提取核蛋白和提取全蛋白用的裂解液是不一样的。一般情况下我们都是买试剂盒,里面包含有细胞裂解液和核裂解液,按照说明书实用就行了。
1
20mmol/L的Hepe(PH
7.9)
2
420mmol/L
NaCl
3
1.5mmol/L
MgCl2
4
2%Igepal
5
0.5mmo/L
EDTA
6
20%甘油
7
1mmol/L
DTT
8
0.25mmol/L
PMSF
9
5ug/ml
Aprotinin
10
5ug/ml
Pepstatin
11
5ug/ml
Leupeptin
或者你可以按照这个配,这个是细胞核裂解液。
做法就是,你按顺序提了全蛋白以后把上清弃掉,在沉淀中加入这个核裂解液,震荡然后离心,此时上清就是核蛋白了。

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